產å“介紹
細胞å稱:人æˆå·¨æ ¸ç´°èƒžç™½è¡€ç—…細胞
形態特性:淋巴æ¯ç´°èƒžæ¨£
生長特性:懸浮生長
特å¾ç‰¹æ€§ï¼š MEG-01ç´°èƒžæ ªæºè‡ªä¸€ä½CML患者æˆå·¨æ ¸ç´°èƒžè½‰æ›æœŸçš„骨髓細胞。 ç´°èƒžè³ªå› åVIII和表é¢çƒè›‹ç™½IIb/IIIa,高碘酸-Schiff(PAS)忇‰ï¼ŒÎ±é†‹é…¸è˜é…¯é…¶å’Œé…¸æ€§ç£·é…¸é…¶é™½æ€§ã€‚ é«“éŽæ°§åŒ–物酶,αä¸é…¸è˜é…¯é…¶ï¼Œæ°¯åŒ–醋酸AS-Dè˜è‹¯é…šé…¯é…¶å’Œå ¿æ€§ç£·é…¸é…¶é™°æ€§ã€‚ 用單克隆抗體BA-1(抗B細胞,粒性白細胞),HPL-3(抗çƒè›‹ç™½IIb/IIIa)å’Œ20.3(æŠ—å–®æ ¸ç´°èƒžï¼Œè¡€å°æ¿)染色æˆé™½æ€§ã€‚ 其他淋巴和骨髓類抗體æˆé™°æ€§ã€‚
培養æ¢ä»¶ï¼š RPMI 1640 (w
傳代方法: 1:
2。3天內å¯é•·æ»¿ã€‚
傳代情æ³ï¼š PN5
å‡å˜æ¢ä»¶ï¼šåŸºç¤ŽåŸ¹é¤ŠåŸº+5%DMSO+20%FBS 
產å“å稱 | 人æˆå·¨æ ¸ç´°èƒžç™½è¡€ç—…細胞 |
英文簡稱 | MEG-01 |
狀態 | è²¼å£ |
細胞冷å‡ä¿å˜ï¼š
1.å‡å˜æ¶²ï¼š92%完全培養基+8%DMSO(å¯ä»¥æ ¹æ“šå¯¦é©—室æ¢ä»¶è‡ªè¡Œé¸æ“‡ï¼‰
2.陿º«æ¥é©Ÿï¼š4度10min,-20度2h,-80éŽå¤œåŽæ¶²æ°®ä¿å˜ã€‚
細胞培養的æ“作æ¥é©Ÿï¼š
1.人æˆå·¨æ ¸ç´°èƒžç™½è¡€ç—…細胞å¸èµ°ç”¨äºŽåŸ¹é¤ŠåŸºï¼ŒåŠ å…¥3-5mL PBSåŽè¼•輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.å¸å¹²å‡ˆPBSåŽåŠ å…¥1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTAï¼Œè¼•è¼•æ–æ™ƒåŸ¹é¤Šçš¿ä½¿èƒ°é…¶æµ¸æ²’細胞表é¢ï¼ŒåŸ¹é¤Šç“¶æ”¾37度培養箱消化;
(細胞å°äºŽæ¶ˆåŒ–æ¯”è¼ƒæ•æ„Ÿï¼Œæ¶ˆåŒ–éŽåº¦æœƒåš´é‡å½±éŸ¿ç´°èƒžç‹€æ…‹ï¼Œå°Žè‡´ç´°èƒžå‚³ä»£æ»äº¡æ¼‚浮或者傳代åŽä¸é•·ã€‚細胞消化到細胞間隙變大但未脫è½ï¼Œå¯ä»¥è¼•輕å¹ä¸‹æ™‚å³å¯çµ‚æ¢ï¼Œç¦æ¢æ¶ˆåŒ–到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡é‡è¼•柔,ä¸è¦å¹å‡ºå¤§é‡æ°£æ³¡ã€‚)
3.åŠ å…¥6-8mlå®Œå…¨åŸ¹é¤ŠåŸºçµ‚æ¢æ¶ˆåŒ–,輕輕å¹ä¸‹ç´°èƒžæ··å‹»ï¼›
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,å†ç”¨æ–°é®®åŸ¹é¤ŠåŸºé‡æ‡¸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: ä¸åŒç´°èƒžç”Ÿé•·é€Ÿåº¦ä¸ä¸€ï¼Œå…·é«”傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞é©ç”¨1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞å¯ä»¥1:2傳代。