產å“介紹
細胞å稱:人肺粘液上皮樣癌細胞
形態特性:上皮細胞
生長特性:貼å£ç”Ÿé•·
特å¾ç‰¹æ€§ï¼šæ¤ç´°èƒžæ ªæºè‡ªè‚ºç²˜è†œä¸Šçš®ç´°èƒžç™Œçš„æ·‹å·´çµè½‰ç§»ç¶ã€‚這個細胞系用化å¸åˆæˆåŸ¹é¤ŠåŸºåˆ†é›¢å¾—åˆ°ï¼Œå¹¶è½‰æ›æˆå«è¡€æ¸…培養液培養。æ¤ç´°èƒžåœ¨åŸ¹é¤Šæ™‚åœ¨äºžé¡¯å¾®çµæ§‹ä¸Šä¿ç•™äº†ç²˜è†œä¸Šçš®ç´°èƒžçš„特性,并表ç¾å‡ºé±—狀分化的多種標記。
培養æ¢ä»¶ï¼š RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%
傳代方法:消化3-5分é˜ã€‚1:
2。3天內å¯é•·æ»¿ã€‚
傳代情æ³ï¼š PN5
å‡å˜æ¢ä»¶ï¼šå®Œå…¨åŸ¹é¤ŠåŸº+8%DMSO
產å“å稱 | 人肺粘液上皮樣癌細胞 |
英文簡稱 | NCI-H292 |
狀態 | è²¼å£ |
細胞冷å‡ä¿å˜ï¼š
1.å‡å˜æ¶²ï¼š92%完全培養基+8%DMSO(å¯ä»¥æ ¹æ“šå¯¦é©—室æ¢ä»¶è‡ªè¡Œé¸æ“‡ï¼‰
2.陿º«æ¥é©Ÿï¼š4度10min,-20度2h,-80éŽå¤œåŽæ¶²æ°®ä¿å˜ã€‚
細胞培養的æ“作æ¥é©Ÿï¼š
1.人肺粘液上皮樣癌細胞å¸èµ°ç”¨äºŽåŸ¹é¤ŠåŸºï¼ŒåŠ å…¥3-5mL PBSåŽè¼•輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.å¸å¹²å‡ˆPBSåŽåŠ å…¥1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTAï¼Œè¼•è¼•æ–æ™ƒåŸ¹é¤Šçš¿ä½¿èƒ°é…¶æµ¸æ²’細胞表é¢ï¼ŒåŸ¹é¤Šç“¶æ”¾37度培養箱消化;
(細胞å°äºŽæ¶ˆåŒ–æ¯”è¼ƒæ•æ„Ÿï¼Œæ¶ˆåŒ–éŽåº¦æœƒåš´é‡å½±éŸ¿ç´°èƒžç‹€æ…‹ï¼Œå°Žè‡´ç´°èƒžå‚³ä»£æ»äº¡æ¼‚浮或者傳代åŽä¸é•·ã€‚細胞消化到細胞間隙變大但未脫è½ï¼Œå¯ä»¥è¼•輕å¹ä¸‹æ™‚å³å¯çµ‚æ¢ï¼Œç¦æ¢æ¶ˆåŒ–到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡é‡è¼•柔,ä¸è¦å¹å‡ºå¤§é‡æ°£æ³¡ã€‚)
3.åŠ å…¥6-8mlå®Œå…¨åŸ¹é¤ŠåŸºçµ‚æ¢æ¶ˆåŒ–,輕輕å¹ä¸‹ç´°èƒžæ··å‹»ï¼›
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,å†ç”¨æ–°é®®åŸ¹é¤ŠåŸºé‡æ‡¸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: ä¸åŒç´°èƒžç”Ÿé•·é€Ÿåº¦ä¸ä¸€ï¼Œå…·é«”傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞é©ç”¨1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞å¯ä»¥1:2傳代。