產(chǎn)品介紹
細(xì)胞名稱(chēng)：人肺腺鱗癌細(xì)胞
形態(tài)特性：上皮樣
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
特征特性：該細(xì)胞是1983年由Gazdar AF和Oie H從一名患有肺腺鱗癌的73歲白人男性患者的胸壁腫物中分離得到；腫塊的獲取先于治療。該細(xì)胞表達(dá)與正常肺組織水平相當(dāng)?shù)膒53，沒(méi)有大的結(jié)構(gòu)DNA的異常。角蛋白和波形蛋白陽(yáng)性，神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性；表達(dá)多種鱗狀細(xì)胞分化標(biāo)志，如谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶活性、被膜素的產(chǎn)生和交聯(lián)包膜的形成。
培養(yǎng)條件： RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法： 1:4~1:8傳代；每周換液2~3次。
傳代情況： C3
凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人肺腺鱗癌細(xì)胞 |
英文簡(jiǎn)稱(chēng) | NCI-H596 |
狀態(tài) | 貼壁 |
細(xì)胞冷凍保存：
1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過(guò)夜后液氮保存。
細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟：
1.人肺腺鱗癌細(xì)胞吸走用于培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞；
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒(méi)細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
（細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感，消化過(guò)度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止，禁止消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。
