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人肺腺鱗癌細胞 
人肺腺鱗癌細胞
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簡稱 : NCI-H596
種屬 :
貨號 : E1936
價格 :
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培養基 : RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 
狀態 : 貼壁
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細胞名稱:人肺腺鱗癌細胞

形態特性:上皮樣

生長特性:貼壁生長

特征特性:該細胞是1983年由Gazdar AF和Oie H從一名患有肺腺鱗癌的73歲白人男性患者的胸壁腫物中分離得到;腫塊的獲取先于治療。該細胞表達與正常肺組織水平相當的p53,沒有大的結構DNA的異常。角蛋白和波形蛋白陽性,神經絲三聯蛋白陰性;表達多種鱗狀細胞分化標志,如谷氨酰胺轉移酶活性、被膜素的產生和交聯包膜的形成。

培養條件: RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 

傳代方法: 1:4~1:8傳代;每周換液2~3次。

傳代情況: C3

凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 

產品名稱

人肺腺鱗癌細胞

英文簡稱

NCI-H596

狀態

貼壁

細胞冷凍保存:

1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。

細胞培養的操作步驟:

1.人肺腺鱗癌細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;

(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;

4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。


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