產(chǎn)品介紹
細(xì)胞名稱：EB病毒感染的人外周淋巴細(xì)胞
形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣
生長特性：懸浮生長
特征特性：該細(xì)胞是 J.V.Melo從一位63歲患有套細(xì)胞淋巴瘤白人女性外周血中分離建立的，經(jīng)EBV介導(dǎo)獲得永生化，該細(xì)胞表達(dá)p16和細(xì)胞周期蛋白D2,低水平表達(dá)細(xì)胞周期蛋白D1。
培養(yǎng)條件： RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法： 1：3傳代,2-3天傳一代
傳代情況： C10
凍存條件： 70% growth medium; 20% FBS; 10% DMSO
產(chǎn)品名稱 | EB病毒感染的人外周淋巴細(xì)胞 |
英文簡稱 | JVM-2 |
狀態(tài) | 貼壁 |
細(xì)胞冷凍保存：
1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。
細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟：
1.EB病毒感染的人外周淋巴細(xì)胞吸走用于培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞；
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
（細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感，消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止，禁止消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。
