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人腎皮質近曲小管上皮細胞 
人腎皮質近曲小管上皮細胞
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簡稱 : HK-2
種屬 :
貨號 : E1838
價格 :
0.00
培養基 : DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS ?
狀態 : 貼壁
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產品介紹

細胞名稱:人腎皮質近曲小管上皮細胞

形態特性:上皮細胞樣

生長特性:貼壁生長 

特征特性:該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉染外生包裝細胞Psi-2,Psi-2細胞產生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,最后將PA317產生的病毒顆粒導入正常的腎皮質近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆
傳代方法: 1:

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況: C5

凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 

產品名稱

人腎皮質近曲小管上皮細胞

英文簡稱

HK-2

狀態

貼壁

細胞冷凍保存:

1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。

細胞培養的操作步驟:

1.人腎皮質近曲小管上皮細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;

(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;

4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。


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