蕎麥源性成分PCR檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法反應(yīng)五要素

蕎麥源性成分PCR檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

甲胎蛋白抗體alpha 1 Fetoprotein

毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體ATM

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體ABCF2

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體ABLIM3

酸性鈣調(diào)蛋白3抗體Acidic Calponin

磷酸化CD156b抗體phospho-ADAM17 (Thr735)

乙醇脫氫酶5抗體ADH5

乙醇脫氫酶6抗體ADH6

溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶5抗體AGPAT5

遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體AIPL1

免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體AIRE

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Ser473)

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Thr72)

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Tyr326)

乙醛脫氫酶2型抗體ALDH1A2

γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體ALDH9A1

衰老相關(guān)蛋白5抗體AGPS

磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體phospho-alpha B Crystallin (Ser59)

釉基質(zhì)蛋白抗體AMBN

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser515)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser791)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser94)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Tyr363)