1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體

磷酸化細胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體

磷酸化周期素依賴激酶2抗體

磷酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體

磷酸化周期素依賴性激酶2抗體

細胞質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體

3號染色體開放閱讀框34抗體

CD134抗體

單核細胞趨化蛋白5抗體

髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體

細胞角蛋白13抗體

白細胞免疫球蛋白樣受體-B抗體

CD33L抗體

細胞角蛋白10抗體

軸突生長因子CD108抗體

唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體

CD329抗體

嗜酸粒細胞趨化蛋白14抗體

1號染色體開放閱讀框57抗體

2號染色體開放閱讀框18抗體

細胞色素c氧化酶6抗體

嗜酸粒細胞趨化蛋白24抗體

巨噬細胞炎性蛋白15

巨噬細胞炎性蛋白抗體

CD72蛋白抗體

中心體蛋白128抗體

著絲粒蛋白O抗體

3號染色體開放閱讀框17抗體

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