PCR試劑盒性質闡述

PCR試劑盒性質：又稱基因體外擴增技術或核酸體外擴增技術。利用兩種與相反鏈雜交并利用附著于目標DNA兩端的寡核苷酸引物在高溫(95℃)使含目標DNA片段的DNA雙鏈變性，分解為單鏈。在較低溫度(37～63℃)與引物退火：然后變溫到72℃左右，在耐高溫DNA聚合物酶作用下引物被沿樣板DNA單鏈延伸合成互補鏈，然后又變性→退火→延伸反復進行。引物大大過量，dNTP過量，酶在高溫中是較穩(wěn)定的，這樣經(jīng)過幾十個循環(huán)，目標DNA片段就按2n數(shù)遞增。用此法可從mRNA中，cDNA庫中擴增出目標基因。過去一般合成500～1000bp較好，現(xiàn)已發(fā)展出大片段(75kb)的PCR，且差錯甚少。PCR技術的發(fā)展還可用于定點突變，質粒重組及FLP等方面。這一技術的作用范圍日益擴大，已成為分子生物學工作者基本技術之一。這項專利技術1985年由美國塞特斯(Cetus)公司開發(fā)。是20世紀80年代分子生物學領域中的一項革命性突破，已在分子生物學、醫(yī)學、法學等領域發(fā)揮了極大的作用。